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電熱培養(yǎng)箱的保養(yǎng)方法以及其特點(diǎn)

點(diǎn)擊次數(shù)：2253 更新時(shí)間2018-12-19 【關(guān)閉】

　　對(duì)電熱培養(yǎng)箱所需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的種類(lèi)和使用建議，也有一定的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范：細(xì)胞培養(yǎng)主要重點(diǎn)在于保持無(wú)菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。

　　1、顯微鏡：倒置式顯微鏡是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室日常工作常規(guī)*設(shè)備，主要用于日常了解細(xì)胞的生長(zhǎng)情況并觀察有無(wú)污染發(fā)生。如資金允許，建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質(zhì)相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時(shí)電影拍攝裝置等，可隨時(shí)拍攝并記錄細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

　　超凈工作臺(tái)：目前絕大部分細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室使用超凈工作臺(tái)實(shí)現(xiàn)無(wú)菌操作，具有操作簡(jiǎn)單、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好。超凈工作臺(tái)主要有兩種——側(cè)流式（垂直式）和外流式（水平層流式）。工作原理一般是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾，由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱，再經(jīng)空氣過(guò)濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區(qū)，從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。

　　2、（1）側(cè)流式工作臺(tái)：空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過(guò)工作臺(tái)面流向?qū)?cè)，也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè)，形成氣流屏障保持工作區(qū)無(wú)菌，工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為封閉式；

　　（2）外流式工作臺(tái)：凈化后的空氣面向操作者流動(dòng)，因而外方氣流不致混入操作，工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為開(kāi)放式，但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作對(duì)操作者不利。超凈工作臺(tái)應(yīng)需要定期請(qǐng)有關(guān)部門(mén)檢查潔凈度，符合要求的超凈工作臺(tái)其潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)，用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀檢測(cè)粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應(yīng)超過(guò)3.5個(gè)/L；空氣流量應(yīng)控制在0.75-1.0m3/s；細(xì)菌菌落數(shù)平均<1個(gè)，根據(jù)無(wú)菌狀況必要時(shí)需要置換過(guò)濾器。

　　3、培養(yǎng)箱：體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，一般適生長(zhǎng)溫度為37℃，溫差變化不應(yīng)超過(guò)±0.5℃。溫度升高2℃時(shí)，變不利于細(xì)胞生存，溫度達(dá)到40℃以上細(xì)胞將很快死亡。因此，可控溫的恒溫培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱是選擇。

　　（1）恒溫培養(yǎng)箱：應(yīng)選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱，此類(lèi)培養(yǎng)箱靈敏度高，溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價(jià)格較便宜，其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養(yǎng)。

　　（2）CO2培養(yǎng)箱：目前多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所需要的一定量的CO2（常用濃度為5％），易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH，適用于開(kāi)放或半開(kāi)放培養(yǎng)。使用培養(yǎng)瓶時(shí)，為使培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)與外界保持通氣狀態(tài)，可將瓶蓋略微旋松，為避免細(xì)胞被污染，使用這種培養(yǎng)方式時(shí)，培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須保持清潔，需定期用紫外線照射或酒精消毒，同時(shí)培養(yǎng)箱內(nèi)應(yīng)放置盛有無(wú)菌蒸餾水的水槽，防止培養(yǎng)液蒸發(fā)，保持箱內(nèi)相對(duì)濕度在100%。

　　（3）細(xì)胞培養(yǎng)耗材：培養(yǎng)細(xì)胞的器皿可用培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶，萊貝在本篇不做詳細(xì)介紹，這部分知識(shí)會(huì)在實(shí)驗(yàn)室耗材知識(shí)部分作重點(diǎn)介紹。

　　4、烘箱（干燥箱）：電熱培養(yǎng)箱用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí)，烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到160℃以上，通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始，至100℃時(shí)，停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。消毒后不能立即打開(kāi)箱門(mén)，以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂，應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開(kāi)門(mén)。

　　5、水純化裝置：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)水的質(zhì)量要求較高，細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)液體的配制用水以及清洗細(xì)胞培養(yǎng)器皿用水都必須事先經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的純化處理。目前有多種純化方法相結(jié)合，可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便，可掛壁式、臺(tái)式、可配儲(chǔ)水箱、也可直接用分液槍、還可根據(jù)各類(lèi)實(shí)驗(yàn)用水要求選擇配置殺菌功能，有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，更有可有效去除掉熱源、內(nèi)毒素的超濾型純水裝置。

　　6、冰箱：電熱培養(yǎng)箱備設(shè)備，應(yīng)，不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對(duì)細(xì)胞有害的物質(zhì)，且應(yīng)保持清潔。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱。（1）普通冰箱：儲(chǔ)存培養(yǎng)液、生理鹽水、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品，可短期保存組織樣本。（2）-20℃低溫冰箱、超低溫冰箱：用于儲(chǔ)存需要冷凍以保持生物活性以及需長(zhǎng)時(shí)期存放的制劑，如酶、血清等。

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